超濾離心管是否需要預(yù)處理,是否可以重復(fù)使用?有答案了
更新時間：2020-10-19 點(diǎn)擊次數(shù)：1885次
超濾離心管也叫離心超濾管，會有一個類似于內(nèi)管和外管的兩個部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當(dāng)高速離心時,分子量比它小的就漏到下面的管子（即外管）中了,分子量比它大的就截留在上面（即內(nèi)管中）,就是超濾的原理.常用于濃縮樣品。
超濾離心管通常不需要預(yù)處理即可使用，不過對于蛋白質(zhì)樣本處理，特別是較稀的蛋白質(zhì)溶液來說(<10ug/mL),用超濾膜濃縮回收率常常是不定量的。雖然PES材料使非特異吸附Z小化，但是,某些蛋白,特別是稀的時候,會有問題。非特異結(jié)合的程度隨著個別蛋白結(jié)構(gòu)的不同而不同。含有帶電的或者疏水結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)更易于不可逆結(jié)合到不同表面。對超濾離心管表面做鈍化預(yù)處理可降低蛋白質(zhì)在膜表面的吸附性損失，大多數(shù)情況下，在濃縮稀蛋白溶液之前預(yù)處理柱子可以提高回收率，因為溶液可填滿膜和表面暴露的空白蛋白吸附位點(diǎn)。鈍化的方法是預(yù)先用Z高容積的鈍化溶液預(yù)浸泡柱子1小時以上，蒸餾水*沖洗柱子，再用蒸餾水離心一次以*除去可能殘留在膜上的鈍化溶液。注意鈍化處理后別讓膜干了。如果要留待以后使用，需要加無菌蒸餾水保持膜濕潤。
超濾離心管通常不能消毒再次性使用。由于單管價格并不便宜，不少人嘗試重復(fù)使用，經(jīng)驗是用蒸餾水清洗膜表面多次，離心一次到兩次，那種可以反向離心的小管子可以加蒸餾水浸泡后反向多離心一次，會好些?？芍貜?fù)用于同一樣品，不用時可用蒸餾水浸泡，但是要防止細(xì)菌污染。不同樣品就不要混用了。有人說泡在20%酒精、1N的NaOH（氫氧化鈉）中，防止長菌，而且防干，只要超濾膜侵了水，就不可以再讓它干，但也有人說會破壞膜結(jié)構(gòu)。反正廠家一般不支持重復(fù)用。多次重復(fù)使用會堵塞濾膜上的孔徑，甚至出現(xiàn)漏液現(xiàn)象，影響實驗結(jié)果。
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